从原理上说,加完裂解液是可以剧烈震荡的,为的是彻底裂解细胞.取上清之后进入酚/氯仿/异戊醇抽提,就要小心轻柔了,因为此时对象是DNA,操作猛烈会打断的.你的三条带有可能从大到小依次是基因组、质粒开环、质粒超螺旋.你提的是什么菌株,怎样的来源,遗传背景清楚吗?至于紫外检测A260-A280无吸收峰但能测出浓度的情况,我也遇到过,有时候是样品浓度过高不在可测量范围内,需要进行适当稀释再测;有时候是样品中杂质太多(注意下其他波长有没有吸收峰?)干扰了DNA检测;有时候是仪器本身出问题了,要进行调试和整修.另,建议不要用试剂盒配的elution溶解最终的基因组DNA,用灭菌的双蒸水比较好,便于紫外检测.
提取细菌基因组时能剧烈震荡么我最近用试剂盒提取细菌基因组,用的是gene star 试剂盒,加完裂解液后保温5min,然
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