应该是引物的延伸性dimer,看弥散程度不像是条带,你可能要看下你第一轮和第二轮引物之间会不会有extensible primer-dimer,毕竟你用的阴性对照产物做模板,里面虽然没有DNA,但是有你第一轮扩增的引物.而你第一轮后阴性对照里的引物浓度肯定高于阳性对照,所以阳性对照没有这个条带也可以这样解释.
如果想消除的话可以提高一下退火温度,或者换一个热启动的酶,要不就换下引物.
不知道你试验要做什么,如果是回收测序的话,这样的条带又不在目标附近,反正要胶回收的,不用变什么也没问题.
我是这么认为的.